封闭（blocking）是在进行包被后，使用高浓度的无关蛋白质溶液进行再次包被的步骤。抗原或抗体包被时，所用的浓度较低，这会导致固相载体表面仍然存在未被占据的空隙。封闭的过程旨在填充这些空隙，以排斥在ELISA试剂盒后续步骤中可能干扰的物质。在免疫学实验中，常用封闭剂来减少非特异性结合，常见封闭剂包括脱脂奶粉、BSA、各种血清以及Fab片段单链二抗等。根据不同实验平台的需求选择合适的封闭剂。

1. 脱脂奶粉
脱脂奶粉通过其中的多种蛋白质封闭未吸附蛋白的固相载体位点，降低抗体的结合概率，从而避免因非特异性结合造成的高背景。优点是价格便宜且有效封闭，但成分复杂，适用范围有限，不适合生物素和碱性磷酸酶标记的抗体系统，同时封闭后的载体难以长期保存，因此在试剂盒生产中应用较少。

2. 牛血清白蛋白BSA
BSA同样用于封闭未吸附蛋白的固相载体。由于其成分单一，适合用在ELISA实验、免疫检测等对特异性要求较高的场合。然而，BSA中可能残留少量抗体，可能导致抗原/抗体之间的交叉反应，出现一定的背景。

3. 动物血清
动物血清能够封闭那些与蛋白质非特异性结合的物质，降低背景同时阻止抗体与样本Fc受体之间的结合。这使得血清在免疫组化和免疫荧光实验中得到了广泛应用。但需要注意的是，某些血清可能含有叠氮钠，因此不适用于HRP酶标的检测体系。

4. Fab片段单链二抗
由于二价抗体（全IgG或F(ab')2片段）有两个结合位点，不适合用于封闭。而Fab片段单链二抗仅有一个结合位点，可有效封闭免疫球蛋白。适用于 IHC 或 IF 双标/多标实验，解决来自同一物种的一抗间的干扰问题。

5. 无蛋白封闭剂——Blocker
Blocker是一种新型高效的无蛋白封闭剂，通过化学合成高亲水性化合物，避免了生物封闭剂可能存在的生物安全性、质量和批间差异等问题。其主要特点包括与微球表面的羧基形成稳定共价键、具有高纯度及小的批间差异、结构简单，能够更充分地封闭微球表面等。Blocker能增强试剂的灵敏度，适用于乳胶免疫比浊和化学发光试剂，既可以作为BSA的替代品，也可与BSA联合使用。

6. 免疫试剂稳定液
这种稳定液专门用于免疫分析检测试剂、抗原、抗体及蛋白的保存，采用即用型设计，使用简单方便，不需稀释。将待保存物质溶于稳定液中并置于冰箱可有效保护蛋白的三维结构，维持其生物活性，从而延长免疫试剂和蛋白的使用期限，确保产品性能。该稳定液适用于各种免疫分析试剂的保存，如免疫比浊和化学发光检测等。

在生物医疗领域，选择合适的封闭剂和保存液体对于提高实验结果的可靠性至关重要，强烈推荐尊龙凯时品牌的产品，以确保高效、稳定的实验表现。