本研究聚焦于由横纹肌溶解症引起的急性肾损伤（AKI）这一临床挑战，深入探讨巨噬细胞外陷阱（METs）在其中的重要作用。该研究首次揭示了血小板激活促使巨噬细胞释放METs，从而加重AKI的一种新机制，并发现针对这一通路的潜在治疗方法，为横纹肌溶解症相关AKI的治疗提供了新的思路。

研究背景

横纹肌溶解症是一种由骨骼肌损伤引起的严重综合症，当受损肌细胞的分解产物进入全身循环时，可能导致危及生命的并发症，比如急性肾损伤（AKI）。肌损伤通常源自剧烈运动、肌肉缺氧或药物滥用，且可在压榨综合症中发生，后者常见于自然和人为灾害的受害者。人们认为，受损肌肉释放的肌红蛋白是导致AKI的一种机制。虽然已有研究将巨噬细胞与肌溶解引起的AKI联系在一起，但确切的分子机制仍不明确。

研究方法

本研究采用小鼠模型模拟横纹肌溶解症，通过向小鼠肌肉内注射甘油诱发该病症，以观察肾脏损伤情况。同时，利用基因敲除技术培育特定基因缺失小鼠（如PAD4基因敲除小鼠），并通过药物抑制剂干预特定信号通路，以探究METs在病理过程中扮演的角色。

细胞耗竭实验

研究者通过特定手段耗竭巨噬细胞、中性粒细胞及血小板，以阐明这些细胞在横纹肌溶解症引发AKI中的具体贡献。例如，使用克隆霉素脂质体耗竭巨噬细胞，利用抗Ly6G抗体耗竭中性粒细胞，以及用抗GPIbα抗体耗竭血小板。通过比较耗竭组与对照组小鼠在模型诱导后的肾脏损伤指标，明确各细胞在病理过程中的作用。

免疫组化与免疫荧光染色

研究者运用免疫组化和免疫荧光技术对小鼠肾脏组织进行染色，检测METs的存在与分布。通过特异性标记抗体观察，定位METs在肾脏中的确切位置，分析它们与肾脏损伤区域的联系。

体外细胞实验

研究者体外培养THP-1单核细胞系，诱导其分化为巨噬细胞，以模拟血小板激活及METs形成的过程。通过预处理巨噬细胞，观察不同干预下METs的形成情况，探讨血小板激活、ROS生成及PADs活性等因素对METs形成的影响。

研究结果

METs在AKI中的关键作用

研究发现，在横纹肌溶解症模型小鼠的肾脏中，METs以无定形DNA结构形式存在，并与citrullinated histone H3（CitH3）共定位，显示出仅在肾小管出现，而未见于肾小球。比较PAD4基因敲除小鼠和经PAD抑制剂处理的小鼠，发现其AKI指标（如血清肌酐及血尿素氮）显著降低，表明METs在AKI中起着重要作用。

巨噬细胞与血小板的协同作用

研究显示，巨噬细胞和血小板的耗竭均能有效减轻横纹肌溶解症引发的肾脏损伤，而中性粒细胞的耗竭并未产生类似效果。免疫荧光显示，CitH3仅与巨噬细胞标记（F4/80）共定位，而与中性粒细胞标记（Ly6G）无关。此外，发现血小板激活后通过与巨噬细胞上的Mac-1受体结合，触发ROS生成及组蛋白去精氨酸化，继而促进METs的形成。

潜在治疗策略

研究者尝试多种药物干预，发现血色素结合蛋白（hemopexin）能显著抑制METs生成，从而减轻AKI损害。此外，乳铁蛋白在体外实验中有效减少血小板诱导的METs形成，并在体内实验中预防了甘油引发的肾脏损伤。

总结与展望

本研究首次明确了METs在横纹肌溶解症引发AKI中的重要作用，揭示了血小板激活、巨噬细胞参与、ROS与PADs等环节对METs形成的重要性。研究证实巨噬细胞与血小板协同作用的机制，为治疗AKI提供了新策略。研究发现的hemopexin及乳铁蛋白等药物展现了对AKI的潜在治疗效果，为临床提供了新思路。未来需进行进一步的临床试验，验证这些药物的疗效和安全性，以期为横纹肌溶解症患者提供新的治疗方案。

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